实验二、细胞及细胞结构
一、实验目的
1、 熟悉光学显微镜下植物细胞的基本结构组成及其特征； 2、 了解后含物的种类与识别方法； 3、 理解和掌握细胞有丝各时期的特征 二、实验要求：
通过本实验的操作和观察训练，基本掌握植物临时玻片标本制作的步骤和方法，懂得
光学显微镜下植物细胞的基本结构组成和特征，理解和掌握植物细胞有丝分裂的过程和特征。根据观察结果，完成实验报告。
三、实验仪器、材料和试剂
1、器具与用品：生物显微镜、镊子、解剖针、刀片、纱布、吸水纸、擦镜纸、载玻片、盖玻片、滴瓶、蒸馏水。
2、植物材料：蚕豆或花生种子、蓖麻种子、棉花种子、小麦颖果纵切制片、玉米、小麦颖果、水稻“种子”、洋葱鳞茎、黑藻叶、红辣椒、马铃薯块茎。
3、临时玻片标本片：洋葱鳞叶表皮细胞装片、马拉松块茎淀粉涂片、辣椒果皮临时玻片。
4、永久玻片：柿胚乳细胞胞间连丝制片、花生子叶制片、松木贯心纵切制片、水稻愈伤组织切片、夹竹桃叶横切制片、石细胞制片、洋葱根尖纵切片、蓖麻胚乳细胞切片、小麦颖果切片
四、实验内容与方法
1临时玻片标本切片的制作（按先后顺序进行如下操作）
取洋葱鳞叶片一片，用双面刀片在其上作3-5mm长宽的“井”字格轻轻划切；取已擦洗干净的载玻片与盖玻片各一枚，将载玻片置于座位前方的桌面上，滴加一滴蒸馏水于玻片；撕取一小片鳞叶，平铺于载玻片上的水滴上方；用镊子夹取一枚盖玻片，先将盖玻片的一边与载玻片上的水滴边缘接触，然后自一侧轻轻放下（如突然放下，易产生气泡，影响观察），如已产生气泡，则在盖玻片一侧加少许蒸馏水，并用解剖针轻挑盖玻片一侧，再垂垂放下，可去除产生的气泡。
2、光学显微镜下植物细胞结构观察 1）．洋葱鳞叶表皮细胞结构观察
将制好的临时玻片置于显微镜载物台上，先低倍物镜观察，表皮细胞近呈六边形网格，选择图象清晰、结构完整的区域，移到视野，换用高倍物镜、配合调节细调焦手轮，可观察到如下细胞结构层次（图2—1）。
细胞壁 细胞壁近透明，用I-KI染色（滴一滴碘液在盖玻片的边缘，用吸水纸从盖玻片的另一边吸水，稍等片刻后，染料即进入细胞），可见厚薄不均的细胞壁，且细胞壁较亮(胞间层)而两边较暗(初生壁)，仔细调节细调焦手轮，可看到初生壁上有许多凹陷的区域——初生纹孔场。
图2—1 光镜下的洋葱表皮细胞基本结构
细胞质 缩小光圈，通过调焦手轮调节焦距，发现紧贴细胞壁有一层较为暗淡的薄层、呈淡黄色，即为细胞质。
液泡 缩小光圈，可见液泡在细胞中占据的体积最大，较贴近细胞壁的细胞质颜色淡。 细胞核 在细胞一侧，可见一折光性强的卵圆形或圆形球体（有时位于细胞)，通过细调焦手轮的转动，可见细胞核边缘有不连续区域，即为核孔，连续的区域即为核膜，在细胞核中还可看到一两个或多个圆球形颗粒，即为核仁。
白色体 在细胞核周围的细胞质中，可看到许多发亮的颗粒，此为白色体。 2) 叶绿体及胞质运动
取黑藻(Hydrilla verticillata (L．f．)Royle )叶片，制成临时玻片，在低倍镜下可见网状叶肉细胞的周围具有许多绿色颗粒--叶绿体，聚焦后转用高倍镜观察，可现细胞内的叶绿体在不断的移动，这就是胞质运动现象（图2—2A）。
图2—2 叶绿体形态及胞质运动模式
3) 有色体
取红辣椒(Capsicum annuum L．))果皮或果肉一块，制成临时玻片，在显微镜下观察可见橙红色棒状或球状的颗粒，即为
有色体（图2-3）。 图2—3 辣椒果皮——示有色体
4）胞间连丝—柿胚乳细胞切片
在低倍镜下将细胞壁上具有清晰的胞间连丝的部位移至视野，然后转至高倍镜下观察，调节光阑调整视野光强和细调焦手轮，可见相邻两个细胞厚厚的细胞壁上有许多由细胞质形成的暗黑色的细丝，即为胞间连丝（图2- 4）。胞间连丝使多细胞的植物体连成一个整体。
图2-4 柿胚乳切片
5）纹孔
单纹孔 用尖头镊子撕一小块经浸泡的小麦颖果果皮制成临时玻片，在显微镜下观察（图2- 5），可以看到整个细胞被一条“亮带”包围，此亮带即为胞间层和初生壁部分。同时可以看到，细胞壁有强烈增厚的次生壁，且不均匀，但增厚区域的边缘却比较整齐，没有增厚的区域即为单纹孔，两个细胞单纹孔成对排列，即为纹孔对。
图2-5 小麦颖果果皮 图2-6 松木贯心纵切
具缘纹孔 取松木茎贯心纵切片在高倍镜下观察，通过细调焦手轮调节焦距，可见管胞上具有许多由3个同心圆构成的结构，此为具缘纹孔（图2-6），其中外圆为纹孔腔边缘 ，内圆为纹孔口的边缘，中间为纹孔塞边缘。
6、后含物
蛋白质 取蓖麻籽纵切片在高倍镜下观察，可见许多有色颗粒，即为糊粉粒（图2-7）。在颗粒中包含有多边形的晶体，即拟晶体、圆球形晶体，即球晶体（由蛋白质与鳞酸钙镁结合而）。
图2-7蓖麻子纵切 图2-8花生子叶切片
脂类 取花生(Arachis hypogaea L．)子叶切片，在高倍镜下观察，可见许多橙红色的圆球形（用苏丹III酒精溶液染色的结果）颗粒，即为油滴（图2-8）。
淀粉 取马铃薯(Solanum tuberosum L．) 块茎切片，在载玻片上涂抹一下，使水滴浑浊，制成临时玻片，显微镜下可见许多椭圆形的颗粒——淀粉粒，通过调节细调焦手轮，可
见淀粉粒由许多明暗交替的同心椭圆 图2-9 马铃薯块茎—示淀粉粒形态
花纹（轮纹）围绕一个点（脐点）组成（图2-9A）。在视野中不仅可以找到具有一个脐点的淀粉粒——单粒（图3-9B），而且还可以找到2个或2个以上脐点的淀粉粒——复粒或半复粒（图2-9C）。
晶体 取夹竹桃(Nerium indicum Mill．)叶片切片观察，可见在叶肉组织的有些细胞中有许多针形的晶体集成的晶簇（图2-10）。 用洋葱老的鳞叶经甘油透明面一部分后制成临时玻片观察，可在细胞中见到棒状或针状的晶。
图2-10 夹竹桃叶片横切体。
7、细胞
1）有丝 取洋葱根尖纵切制片，在低倍镜下观察，由先端向后观察可见其最前端由许多不规则的薄壁细胞组成的帽状结构——根冠；在根冠内方，细胞形态为近方形，横壁一般比纵向壁略长，此区域为分生区。将分生区移至视野，转换至高倍镜下仔细观察，按照各期细胞核特征，寻找处于有丝不同时期的细胞。
2）无丝（图2-11）
图2-11 细胞的无丝分裂
五、注意事项 1、严格按规程操作使用显微镜；切不可随便拆卸显微镜各零部件，注意及时保养，防潮湿、防腐蚀。
2、注意区分单双子叶植物胚芽的结构异同；注意细胞后含物、细胞各时期特征的区别和联系。
六、作业
1．绘洋葱鳞叶表皮细胞2~3个，并注明各部分名称。
2．绘柿胚乳细胞两到三个——示胞间连丝，并注明各部名称。
