上式的物理意义［］是指同一溶质在液晶态的保留指数Ｉ液壕与在液态的保留指数Ｉ液和外推到同一温度Ｔ０时的保留指数之差。［３］ 金鑫荣、葛海霖等，分析化学，１４（１１），８０１（１９８６）．［４］ 卢佩章、戴朝政，《色谱理论基础》，科学出版社，北京，Ｐ．１８８，１９８９．保留指数与微观参数之间的关系［］为：［５］ Ｍ．Ｊ．Ｓ．Ｄｅｗａｒ，Ｊ．Ｐ．Ｓｃｈｒｏｅｄｅｒ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，８６，５２３５（１９６４）．［６］ Ｍ．Ｊ．Ｓ．Ｄｅｗａｒ，Ｊ．Ｐ．Ｓｃｈｒｏｅｄｅｒ，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，３０，３４８５（１９６５）．式中，Ｂｎ为正构烷烃的Ｂ１值，ＶＡ＝ＶＡ－Ｖｎ，Ｖｎ为ｎ个碳原子正构烷烃的摩尔体积，ＣＨ２为溶质同系物中每增加一个亚甲基引起分子极化率的变化。式中其它符号见式（２）（３）解释。［７］ 同［４］，Ｐ．２０４．（收稿日期：１９９２年３月１２日，修回日期７月２４日）Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆ Ｐａｒｔｉｃｕｌａｒ Ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ ｆｏｒ Ｌｉｑｕｉｄ－Ｃｒｙｓｔａｌ ＧＣ－Ｓｔａｔｉｏｎａｒｙ Ｌｉｑｕｉｄ ．Ｕｓｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｅｎ－ｔｈａｌｐｙ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ，（Ｈ）Ｌ－ＬＣ，ａｎｄｔｈｅ Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ Ｅｎｔｒｏｐｙ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ，（Ｓ）Ｌ－ＬＣＪｉｎ Ｘｉｎｒｏｎｇ，Ｓｕｎ Ｊｕｎｊｉｅ ＆Ｌｕｏ Ｘｉｙｕｎ，Ｅａｓｔ ＣｈｉｎａＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ，２００２３７同样，Ｉ和ＩＴ也符合上式。由于同一溶质都在同一外推温度下，因此在由（ＩＴ０ＩＴ０）所得出微观参数之间的关系式中可消去１００ｎ和Ｂｎｎ，而分母部分两者完全相等，分子部分为（Ｂ１Ａ＋Ｂ２＋Ｂ＋ＲＴＶＡ／Ｖ剂）液壕－（Ｂ１Ａ＋Ｂ２２Ａ＋Ｂ３＋ＲＴＶＡ／Ｖ剂）骸。结合式（１）和（２）可以得出结论：某溶质在液晶固定液上的特殊液晶效应ＩＴ０值，实质Ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｏｆ ｅｎｔｈａｌｐｉｅｓ ｏｆ ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ ｉｎｌｉｑｕｉｄ ａｎｄ ｌｉｑｕｉｄ－ｃｒｙｓｔａｌ ｓｔａｔｅｓ，（Ｈ）Ｌ－ＬＣ，ａｎｄ ｔｈｅｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ｅｎｔｒｏｐｙ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ，（Ｓ）Ｌ－ＬＣ，ｆｏｒｓｅｖｅｒａｌ ｓｏｒｔｓ ｏｆ ａｒｏｍａｔｉｃ ｈｙｄｒｏｃａｒｂｏｎ ｉｓｏｍｅｒｓ ｈａｖｅｂｅｅｎ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｂｙ ＧＣ．Ｔｈｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎｍａｃｒｏｓｃｏｐｉｃ ａｎｄ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｉｃ ｑｕａｎｔｉｔｉｅｓ ｆｏｒ ｐａｔｉｃｕｌａｒ上就等于宏观物理量（Ｈ）Ｌ－ＬＣ和（Ｓ）Ｌ－ＬＣ值。参考文献［１］ 葛海霖、朱明华、邵令娴、金鑫荣，化学学报，４２（５），４４７（１９８４）．ｌｉｑｕｉｄ－ｃｒｙｓｔａｌ ｅｆｆｅｃｔ，ＩＴＯ，ｗｈｉｃｈ ｉｓ ｅｑｕａｌ ｔｏ －ＩＴ０，ｗａｓ ｍａｄｅ ａｌｓｏ．［２］ Ｚ．Ｗｉｔｋｉｅｗｉｃｚ，Ｊ．Ｓｚｕｌｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．，２４６，３７（１９８２）．衍生化反相高效液相色谱测定葡萄酒中有机酸的研究关家锐邓丛蕊王吉顺王淑仁（山东大学实验中心，济南，２５０１００）葡萄酒中有近百种有机酸〔１〕，其中主要是乳酸、乙酸、酒石酸、苹果酸、柠檬酸和琥珀酸，它们的含量占葡萄酒中有机酸总量的９５％以上。这些酸的含量决定着葡萄酒的口感、品质和稳定性等特性。葡萄酒中有机酸的主要测定方法有酸碱滴定法［２，３］、纸色谱葡萄酒中多种多元有机酸的存在使衍生化液相色谱法分析葡萄酒中有机酸比较困难，很少有报道。我们在研究中，选用－溴苯乙酮作酯化试剂，不预分离葡萄酒中有机酸，以１８－冠－６作相转移催化剂进行衍生化反应。衍生化后的样品使用Ｃ１８柱分离，紫外检测器检测，定量测定了葡萄酒中六种主要有机酸。本方法操作简单，分析结果重现性好，定量准确，样品中水、糖、色素等其它物质的存在不干扰衍生化反应及色谱分析。法［４］薄层色谱法［５］和气相色谱法［６］等。近年来，离子色谱法和直接高效液相色谱法［８］得到重视，但由于检测方法的和葡萄酒中其它物质的干扰，使这两种方法的检测灵敏度及定量结果受到影响。实验部分（一）仪器和试剂美国Ｖａｒｉａｎ５０６０型高效液相色谱仪；ＵＶ－１００紫外检测器。苹果酸－溴苯乙酮分别经重结晶，其它标准酸及化学试剂均为分析纯，三蒸水自制。缓冲溶液为ｐＨ６．８的０．０８ｍｏｌ／Ｌ磷酸氢二钠－磷酸二氢钾水溶液。葡萄酒样品由烟台国家葡萄酒质量监督检验测试中心提供。（二）色谱条件色谱柱为ＭＩＣＲＯ ＰＡＫ ＭＣＨ－１０（３００．４６ｃｍ）；柱温为室温；检测波长２５４ｎｍ流速１．５ｍｌ／ｍｉｎ；流动相梯度：Ｔ＝０时甲醇：水＝３５：６５，Ｔ＝１０ｍｉｎ时甲醇：水＝５０：５０，Ｔ＝１５ｍｉｎ时甲醇：水＝５５４５Ｔ＝２５ｍｉｎ时甲醇：水＝９０１０；进样量１０ｌ。（三）样品酯化有机酸标准溶液为乙酸０．０１７ｍｏｌ／Ｌ，乳酸０．０１１ｍｏｌ／Ｌ，酒石酸０．０１３ｍｏｌ／Ｌ，苹果酸０．００７ｍｏｌ／Ｌ，柠檬酸０．００５ｍｏｌ／Ｌ琥珀酸０．００８ｍｏｌ／Ｌ，分别用样品用氢氧化钾调整ｐＨ至７．０后，取０．１５ｍｌ于１ｍｌ螺口反应试管内，再加入０．２ｍｌ缓冲溶液、０．２ｍｌ衍生化试剂和０．２ｍｌ丙酮，加盖密封，１００水氢氧化钾调整ｐＨ至７．００。衍生化试剂为－溴苯乙酮０．１５１ｍｏｌ／Ｌ，１８－冠－０．００６ｍｏｌ／Ｌ混合丙酮溶液。浴中反应４０ｍｉｎ，取出冷却至室温后，取１０进行色谱分析，标准样品色谱图见图１葡萄酒样品色谱图见图２。结果与讨论（一）ＰＨ值及缓冲溶液浓度对酯化反应的影响ＰＨ值决定着酯化反应过程中有机酸能否以酸根离子的形式与冠醚和钾离子所形成的伪正离子配根据相转移催化对有机溶剂的要求和葡萄酒中含水量高（约８５－９０）的特点，而且为了使生成的酯能够很好地溶解，实验选用了丙酮为非质子化试剂。丙酮与水的比例约在１：１至３：１之间。此外，还比较了封闭反应法与回流法酯化反应的效果，结果表明前一种方法较好。为了防止葡萄酒中色素、酚类化合物等其它物质在酯化和分析过程中的干扰，在实际样品分析中比较了聚乙烯吡咯烷酮脱色与不脱色的结果。结果对，从水相进入有机相与－溴苯乙酮反应，图３给出了标准样品在不同ＰＨ条件下的酯化反应状态。为保证整个酯化反应过程中ｐＨ值的稳定，我们选用了磷酸氢二钠－磷酸二氢钾缓冲液体系。缓冲液浓度对酯化效率的影响见图４。可明显看出，随着缓冲液表明，样品脱色与否都不影响酯化、分离及定量。表２浓度的增大，酯化效率呈下降趋势。这是由于缓冲液浓度增大，使整个酯化反应溶液的离子强度增大，阻碍了酸根离子进入有机相的反应［９］。根据实验结果，我们选择溶液ｐＨ７，缓冲液浓度为０．０８ｍｏｌ／Ｌ（二）反应温度和时间对酯化反应的影响反应温度是影响酯化效率的一个重要因素。在选定ｐＨ值及缓冲溶液浓度条件下，反应温度的变化对各有机酸酯化完成有明显影响。虽然高温有利于极性有机酸的酯化完成，但温度过高，酯化试剂明显分解［０］。实验中选用的反应温度为１００。在选定的反应温度条件下，酯化反应完成的总趋势是随反应时间的增长而趋于完成。反应４０ｍｉｎ后，酯化反应基本进行完全。（三）回收率的测定根据选定的最佳酯化条件，以解百纳干红葡萄酒为基础，采用内加法，每０．１ｍｌ酒样中加入０．０５ｍｌ与酒样中有机酸浓度接近的混合标准酸溶液，进行测定，结果见表１。本方法对乳酸、乙酸、酒石酸、苹果酸、琥珀酸和柠檬酸的检测下限分别为１．１１１０－８、１．６７１０－７６．６７１０－８１．４９１０－７８．４７１０－８和５．２１１０－８ｍｏｌ／Ｌ；变异系数（ｎ＝６）分别为１．４２．３、２．５１．８４．２和４．６。表１有机酸酯化回收率（单位：１０－３ｍｏｌ／Ｌ）（四）其它条件的选择给出了部分商品葡萄酒中有机酸的定量结果。表２葡萄酒中有机酸含量（单位：１０－３ｍｏｌ／Ｌ）（五）结论本法测定葡萄酒中有机酸与Ｃ１８柱直接进样测定葡萄酒中有机酸法相比，具有紫外检测灵敏度高、其它干扰少、定量准确等特点，同时，克服了由于葡萄酒中存在的铁、铜等重金属离子易与柠檬酸等络合［１而使直接检测比较困难的缺点。与其它衍生化方法相比，由于酯化反应直接在含水样品中完成，避免了一般衍生化过程中有机酸预分离、盐化、蒸干等步骤，提高了样品的回收率，缩短了样品处理、分析的时间。参考文献［１］ Ｌ．Ｎｙｋａｎｅｎ，Ｈ．Ｓｕｏｍａｌａｉｎｅｎ，Ａｒｏｍａ ｏｆ Ｂｅｅｒ，Ｗｉｎｅａｎｄ Ｄｉｓｔｉｌｌｅｄ Ａｌｃｏｈｏｌｉｃ Ｂｅｖｅｒａｇｅｓ，Ｒｅｉｄｅｌ Ｐｕｌ．Ｃｏ．，Ｈｏｌｌａｎｄ，Ｐ．８０，１９８３．［２］ 轻工业部标准ＱＢ９２１－８４，葡萄酒及其试验方法》，北京，Ｐ．５，１９８４．［３］ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｏｆ Ｏｆｆｉｃｉａｌ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｓ，ＯｆｆｉｃｉａｌＭｅｔｈｏｄｓ ｏｆ Ａｎａｌｙｓｉｓ，１４ｔｈ ｅｄ．，Ａｒｌｉｎｇｔｏｎ，ＶＡ，Ｐ．２２０，１９８４．［４］ Ｒ．Ｅ．Ｋｕｎｋｅｅ，Ｗｉｎｅｓ Ｖｉｎｅｓ，４９（３），２４（１９６８）．［５］ Ｌ．Ｌｉｎ，Ｈ．Ｔａｎｎｅｒ，ＨＲＣ＆ＣＣ，８（３），１２６（１９８５）．［６］ Ｔ．Ｓｈｉｎｏｈａｒａ．Ａｇｒｉｅ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，４９，２２１１１９８５）．［７］ Ｋ．Ｆｕｊｉｍｕｒａ，Ｂｕｎｓｅｋｉ Ｋａｇａｋｕ，３５（６），５０（１９８６）．［８］ Ｒ．Ｍ．Ｍａｒｃｅ，Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉａ，２９（１／２），５４（１９９０）．［９］ Ｆ．Ｃａｃｃａｍｏ，Ｊ．ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．，３６２，４７（１９８６）．［１０］ Ｅ．Ｍｅｎｔａｓｔｉ，Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．，３２３，１７７（１９８５）ｔａｒｉｃ，ｍａｌｉｃ，ｓｕｃｃｉｎｉｃ ａｎｄ ｃｉｔｒｉｃ ａｃｉｄｓ，ｉｎ ｗｉｎｅｓ ｗｅｒｅ［１１］ 朱梅、李文庵、郭其昌，《葡萄酒工艺学》，修订版，轻工业出版社，北京Ｐ．５６，１９８３．（收稿日期：１９９２年４月１７日，修回日期：１０月４日）ｄｉｒｅｃｔｌｙ ｃｏｎｖｅｒｔｅｄ ｔｏ ｔｈｅｉｒ ｐｈｅｎａｃｙｌ ｅｓｔｅｒｓ ｉｎ ａｑｕｅ－ｏｕｓ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｕｓｉｎｇ １８－ｃｒｏｗｎ－６ ｅｔｈｅｒ ａｓ ｐｈａｓｅ ｔｒａｎｓ－ｆｅｒ ｃａｔａｌｙｓｔ．Ｔｈｅ ｅｓｔｅｒｓ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ ｏｎ ａ Ｃ１８ ｃｏｌ－ｕｍｎ ｗｉｔｈ ＵＶ ｄｅｔｅｃｔｏｒ．Ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｌｉｍｉｔｓ ｆｏｒＨｉｇｈ Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ Ｌｉｑｕｉｄ ＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃＡｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｐｈｅｎａｃｙｌ Ｅｓｔｅｒｓ ｏｆ Ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｄｉ－ｒｅｃｔｌｙ Ｅｓｔｅｒｉｆｉｅｄ ｉｎ Ｗｉｎｅｓ Ｇｕａｎ Ｊｉａｒｕｉ，Ｄｅｎｇ Ｃｏｎｇ－ｒｕｉ，Ｗａｎｇ Ｊｉｓｈｕｎ ａｎｄ Ｗａｎｇ Ｓｈｕｒｅｎ，ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＣｅｎｔｅｒ，Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｊｉｎａｎ，２５０１００Ｓｉｘ ｍａｉｎ ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄｓ，ａｃｅｔｉｃ，ｌａｃｔｉｃ，ｔａｒ－ｍｏｓｔ ａｃｉｄｓ ｗｅｒｅ １．１１－１６．７１０－８ｍｌｏ／Ｌ，ｔｈｅ ｃｏｅｆ－ｆｉｃｉｅｎｔｓ ｏｆ ｖａｒｉａｔｉｏｎ ｗｅｒｅ ｆｒｏｍ １．４％ ｔｏ ４．６％．Ｔｈｅｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ ｏｆ ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄｓ ｉｎ ｗｉｎｅ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ９０．８１０３．１％．三乙膦酸铝及其与代森锰锌混剂的顶空气相色谱分析方法范志先宋述尧马凡如龙自强（吉林农业大学，长春，１３０１１８）三乙膦酸铝（ｐｈｏｓｅｔｈｙｌ－Ａｌ）是一种防治果蔬作物疫病和霜霉病的内吸性杀菌剂。它与代森锰锌混乙膦酸铝的含量。三乙膦酸铝纯品碱解生成乙醇的合后具有增效作用。关于混剂中三乙膦酸铝的分析方法，仅见消化－比色定磷法的报道〔１〕。本文参考乙醇顶空气相色谱分析方法（２３），对三乙膦酸铝及其混理论值为３９．０３％。（四）实验步骤１．内标溶液的制备称取０．１５０ｇ叔丁醇于１０００ｍｌ容量瓶中，用氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀。剂（ＮＤ－９０１）中三乙膦酸铝的顶空气相色谱法进行了系统研究。本方法在国内外尚未见报道。２．标样和试样溶液的制备称取０．１ｇ精确至０．２ｍｇ）三乙膦酸铝标准品和约含０．１ｇ（精确至实验部分（一）试剂与溶液０．２ｍｇ）三乙膦酸铝的试样于各自的反应瓶中，用移液管准确加入４０ｍｌ内标液，密封摇匀。三乙膦酸铝：原粉，９８％标准品；代森锰锌原粉：８８．６２％；无水乙醇、亚磷酸氢二钠、氢氧化铝、叔丁醇（用前重蒸馏两次），分析纯；氢氧化钠溶液：分析纯（ＮａＯＨ＝２ｍｏ１／Ｌ）（二）仪器气相色谱仪ＳＰ－５０１，ＦＩＤ，Ｃ－Ｒ３Ａ，配顶空进样器；色谱条件：３ｍ４ｍｍ不锈钢柱，内装１０ＰＥＧ－２０Ｍ＋上试１０１白色硅烷化担体（６０－８０目）；汽化室、检测室１２０，柱室９５氮气２５ｍｌ／ｍｉｎ氢气７０ｍｌ／ｍｉｎ，空气４５０ｍｌ／ｍｉｎ；保留时间：叔丁醇（内标物）４．９０ｍｉｎ，乙醇５．７５ｍｉｎ；分离度：Ｒ＝１．２（图１）。（三）方法原理３碱解和测定将标样、试样反应瓶放入８０１超级恒温水浴中，碱解１．５小时。在选定的色谱条件下，超压采样按常规分析测定，并计算结果。（五）实验方法建立的依据１．盐析效应的测定反应瓶内混合液体积为三乙膦酸铝在密闭的反应瓶中完全碱解，生成定量的乙醇。乙醇在反应瓶内建立气液平衡，利用内标法，测定汽相中乙醇的浓度，从而计算出样品中三４０ｍｌ，气液比为１５：１混合液中乙醇、叔丁醇的浓度分别为１０００１０－６和１５０１０－（Ｖ／Ｖ）。分别考察氢氧化钠溶液、三乙膦酸铝碱解产物的盐析效应。
