节能环保 ￡０ Ｉ：Ａ 曰ＯⅣ ０ＲＬＤ ２０１乃２ 反式一４一羟基一Ｌ一脯氨酸作为手性选择剂 在薄层色谱中的应用研究 李 扬（贵州省环境监测中心站，贵州贵阳５５００００） 【摘要】制备了以反式－４一羟基一Ｌ一脯氨酸为手性选择剂的手性薄层硅胶板，研究了其对手性物质的分离能力，取得了一定的效果，并探讨了 多方面因素（如展开剂ｐＨ、温度等）对分离效果的影响。 【关键词】反式一４一羟基一Ｌ＿脯氨酸；手性分离；薄层色谱 【中图分类号】ＴＱ９２２ 【文献标识码】Ａ 【文章编号】２０９５—２０６６（２０１７ １０５—００３４—０２ 对映异构体【 】的分离在生物化学 医药工业和现代立体选 １实验部分 １．１仪器与试剂 反式一４一羟基一Ｌ一脯氨酸（Ａｄａｍａｓ公司）：外消旋化合物 择有机合成方面都具有十分重要的意义。近年来，因为速度 快、分离效能高的优点目。色谱法翻在手性分析分离中发挥越来 越重要的作用。８０年代中期以来，科学家们在色谱方面研究 （Ｆｌｕｋａ和Ｓｉｇｍａ公司）；其余试剂为国产分析纯（天津市风船 的热点转到了液相色谱在手性分离中的应用上面。手性衍生 化学试剂科技有限公司）；水是反渗透纯水。 化试剂、手性流动相添加剂和手性固定相Ｈ，以及相关联的色谱 手性药物用无水乙醇配制成５ｍｇ／ｍＬ的溶液。手性氨基酸 技术陆续产生．把对映异构体的分离研究［５１推到了新的高度 。 用乙醇／水（５０／５０，ｖ／ｖ）配制成５ｍｇ／ｍＬ的溶液。反式一４一羟基一 薄层色谱法ｔ７Ｊ具有设备简单、操作简便、分析速度快、经 Ｌ一脯氨酸用甲醇配制成不同浓度（１ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬ、 济、结果直观等优点，并且还能快速更换流动相，在生化、医药 １５ｍｇ／ｍＬ）的溶液。薄层色谱所用的硅胶Ｇ（１０～４０１ｘｍ）是青岛 卫生、化学、化工等各个领域被广泛使用，而且近年来薄层色 海洋化工厂产品。 谱在手性分离中的应用也引起了人们的重视 一。 本研究将反式＿４一羟基一Ｌ一脯氨酸作为手性剂直接应用在 １．２显色剂的配置 （１）０．２％水合茚三酮乙醇溶液：称取０．２ｇ茚三酮，再用无 水乙醇定容至１００ｍＬ，即可用于显色。 薄层色谱中．以手性化舍物为拆分对象，对氨基酸对映异构体 的分离做了初步研究。本章中对其他一些条件（如展开剂ｐＨ、 温度等）对薄层色谱分离效果的影响也进行了讨论。 （２）碘化铋钾试剂：称取０．８５ｇ碱式铋溶于１０ｍＬ冰 － －●一－—－‘一 水质评价结果和各项水质监测指标的统计分析，然后据此绘 水质监测以及评价的具体需要．通过水库富营养化、综合指数 制出相应的统计图表．从而使水源地的水质在一定时间内的 评价以及采用单因子评价的水质评价模型进行相应的计算和 发展变化状况变得更加的直观和清晰．通过对比分析，对各个 分析，并通过ＧＩＳ和水质模型的相互结合，从而使得评价结果 水质评价等级出现次数的百分比状况进行计算，并计算出以 能够以更加直观的专题图的形式呈现出来。 监测指标为统计单位的监测站点指标的最小值、最大值以及 则以及实用性原则。系统的开发要符合城市饮用水水源地的 ３．２功能模块设计 ３．２．１地图服务 平均值．最后绘制出相应的统计数据和复合折线图。 ４结束语 建立基于ＧＩＳ的城市饮用水水源地水质监测以及评价系 统．可以对水源地水质状况及其变化进行有效监测，并据此制 定相应的保护和处理措施。鉴于目前饮用水水源地水质安全 地图服务功能模块提供的地图服务包括基础信息查询以 及地图浏览两部分．能够实现城市饮用水水源地区域地图的 图层控制、平移以及缩放．而且也能实现基础地理数据信息的 属性以及图形间的双向查询。 ３－２．２水质监测 问题日益突出的现实环境：①需要在对其进行监测以及评价 的基础上制定相应的饮用水水源保护长远规划：②需要建立 具体的城市饮用水源保护目标责任制度和定量的考核管理方 法：⑧加强相关饮用水水源地保护的制定和工业污染的 用户提供全方位且多样化的水质监测数据查询、纵向（时间变 治理力度．同时通过水源保护区监督机构的建立划分水环境 化）查询、横向比较查询以及实时查询，如此一来才能更好地 保护区．从而达到保护城市饮用水水源的目的。 了解水质监测状况以及相应的监测数据。 水质监测功能模块主要是针对水质监测指标的以监测点 和日期为基本单位的表格及图形方式的查询及浏览。能够为 ３．２．３水质评价 水质评价功能模块主要包括了专题图绘制、模拟评价以 参考文献 ｎ１刘会文，王洪云，王秀朵，等．北方某城市中心城区景观河道水质综 及水质评价三个部分．主要是在根据地表水环境质量标准以 合评价叨．给水排水，２ｏ１５，４１（５）：１２３－１２６． 及质量评价办法的基础上．并通过各项水质监测的数据所进 ｆ２１黄蓉姿，陈冬毅，张少君，等．基于标识指数法的梅溪河饮用水源水 行的水质分等以及定级．如此一来就可以建立有效的水质评 质评价ＩＪ１．净水技术，２ｏ１５，３４（６）：７３－７６． 价结果表．最后再运用ＧＩＳ将区域地理环境、属性数据以及空 ｆ３１黄海东，张克峰．小城镇水源水质评价方法选择方案探讨［Ｊ］．西南给 间数据结合在一起．从而绘制出相应的城市饮用水水源地的 水质评价结果专题图。 ３．２．４统计分析 排水，２Ｏｌｌ，３３（２）：２２—２５． 收稿日期：２０１７—２—３ 统计分析功能模块的功能主要是对城市饮用水水源地的 ３４ 上０Ｗ ＣＡＲＢ０ＮＷＯＲＬＤ ２０１７／２ 节能环保 乙酸及４０ｍＬ水中；称取８ｇ碘化钾溶于２０ｍＬ水中。取上述两 也不大；对于美托洛尔，其Ｓ和Ｒ构型的对映体Ｒｆ随着温度 其Ｒｆ值有较大变化，△Ｒｆ值有明显增大。 种溶液等量混合。置于棕色瓶中保存备用。使用前取ｌｍＬ溶 升高，温度对手性化合物的分离产生影响的主要原因可能是改 液与４ｍＬ冰乙酸、２０ｍＬ水混合。即可用于显色。 １－３普通硅胶手性薄层板的制备 ２ｇ硅胶Ｇ。加入反式一４一羟基一Ｌ一脯氨酸，加水成糊状，均 变了分子间的作用。影响了各有机相溶剂的蒸发程度及展开 槽中蒸气的比例．从而影响了样品物质的层析行为。 匀涂敷在１０ｘｌ０ｃｍ的光滑玻璃板上，晾干，再置于６０℃烘箱 ２．４其他条件对分离效果的影响 在薄层色谱的操作中，在玻璃板上涂布硅胶时尽可能使 薄层光滑、厚度均匀；在薄层板上点样时，应控制其斑点不宜 中烘烤８ｈ，即得所需手性薄层板。 １．４薄层色谱的展开和显色 展开后的薄层板待挥发去溶剂后，显色，然后置于６０℃烘 太大．且其原点应在展开剂液面以上；展开之前需要对展开槽 箱中烘烤２０ｍｉｎ。氨基酸用０．２％水合茚三酮溶液显色．呈现红 进行预饱和 这些因素都会影响薄层板的分离效果。色斑点。手性药物用碘化铋钾试剂显色，呈现黄色斑点。 ２结果与讨论 ２．１手性拆分 实验以手性物质作为拆分对象，详细试验了薄层板对多 种手性物质在多种展开剂系统中的拆分情况，结果表明在在 正丙醇／氨水（２／ｌ，、，／ｖ）和氯仿／丙酮，正丁醇／氨水（３／３／４／１，ｖ／ｖ） 展开剂中。美托洛尔的对映体得到了拆分。 在正丙醇／水（２／１。ｖ／ｖ）和正丙醇／苯酚／冰醋酸／水（３／３／２／４， ｖ／ｖ）展开剂中，半胱氨酸的对映体得到了拆分。 在正丁醇，甲醇／水／冰醋酸（５／１／１／１。ｖ，ｖ）展开剂中。蛋氨酸 的对映体得到了拆分。 ２．２展开剂ｐＨ值对分离效果的影响 在上述其它实验条件（如手性剂浓度、温度等）不变的条 件下．向展开剂中缓慢滴加醋酸或者二乙胺溶液，改变展开剂 的ｐＨ值，用ｐＨ计测定展开剂ｐＨ值，在展开剂ｐＨ＝１０（± ０．０５）、ｐＨ＝７（±０．Ｏ５）、ｐＨ＝４（±０．０５）、ｐＨ＝ｌ（±Ｏ．Ｏ５）的情况下，对 美托洛尔、半胱氨酸、蛋氨酸进行分离，计算样品Ｒｆ值，井将 相关数据记录在表ｌ中 裹１展开剂ｐＨ对手性化合物迁移值的影响 氨基酸 蔓托洛尔（正丙醇，氨 半胱氨酸（正丙醇，水＝ 蛋氨酸（正丁醇／甲醇／ 水＝２／１） ２／１） 水，冰醋酸＝５／１／１／１） ｐＨ Ｓ Ｒ △ Ｌ Ｄ △ Ｌ Ｄ △ ｌ ０．６０ ０．４９ ０．１３ Ｏ．６０ Ｏ－３７ ０．２３ ０．４９ Ｏ．１９ Ｏ－３０ Ｒｒ ４ Ｏ．６３ ０．４８ Ｏ．１３ ０．６４ Ｏ．３９ Ｏ．２５ ０．５１ Ｏ＿２０ ０．３１ ７ ０．５３ ０．４０ ０．１３ ０．４５ Ｏ．２９ ０．１６ Ｏ．４ｌ Ｏ．１８ Ｏ．２３ １０ ０．５１ ０．４１ ０．１０ ０．４４ ０－３Ｏ ０．１４ Ｏ＿３７ ０．１２ ０．２５ 由表ｌ我们可以看出．在其它实验条件不变的情况下，单 一地改变溶液ｐＨ。随着溶液ｐＨ的变小，上述三种手性化合物 的迁移值Ｒｆ慢慢变大，在达到ｐＨ＝４时趋于平缓，继续减小 ｐＨ值，迁移值Ｒｆ变化不大。 因此选定展开剂ｐＨ＝４时。薄层板分离效果达到最佳。 ２．３温度对分离效果的影响 在上述其它实验条件（如手性荆浓度、展开剂ｐｎ等）不变 的情况下，在室温２４℃和２８℃的条件下对美托洛尔、半胱氨 酸、蛋氨酸进行分离，计算样品Ｒｆ值，并将相关数据记录在表 ２中 寰２温度对手性化合物迁移值的影响 氨基酸 美托洛尔（氯仿，丙酮， 半胱氨酸（正丙醇／ 蛋氨酸 正丁醇／甲醇 正丁醇／氨水＝３／３／４／１） 水＝２／１ 水，冰§ ｝酸＝５１１／１１１） 温度（℃） Ｓ Ｒ △ Ｌ Ｄ △ Ｌ Ｄ △ ２４ Ｏ．３Ｏ ０．２３ ０．０７ ０．４５ ０．２９ Ｏ．１６ Ｏ．５５ Ｏ．２４ ０ｌ３ｌ ２８ ０－３２ Ｏ．２０ Ｏ．１２ ０．４７ ０．３Ｏ Ｏ．１７ Ｏ．５６ ０．２４ Ｏ．３２ 由表２我们可以看出，在其它实验条件不变的情况下，在 不同的室温下，对上述三种手性化合物进行分离，对于半胱氨 酸和蛋氨酸，改变温度，其迁移值Ｒ 的变化不大，ＡＲ 值变化 ３结论 本文制备了以反式一４一羟基一Ｌ一脯氨酸为手性选择剂的手 性薄层硅胶板．在多种展开剂系统下对手性物质进行了拆分， 美托洛尔、半胱氨酸、蛋氨酸得到了较好的拆分。另外还探讨 了多方面因素（如展开剂ｐＨ、温度等）对拆分效果的影响，优 化了色谱分离的条件。 参考文献 ［１］袁黎明．手性识别材料【Ｍ】．北京：科学出版社，２０１０：１－１９． 『２１沈报春．大环抗生素及其衍生物手性固定相的研制与药物对映体分 离研究ｆＤ１．杭州：浙江大学，２００７：２—３． ［３】曾泳淮，林树昌．分析化学（仪器分析部分）第二版［Ｍ］．北京：高等教 育出版社，２０１０：３３３～３３６． 【４］丁国生，黄晓佳，刘莺，王俊德．硅胶键合手性配体交换色谱固定相 拆分 一氨基酸田．分析测试学报，２００３，２２（６）：３３～３５． ［５】尤田耙．手性化合物现代研究方法［Ｍ】＿ 争肥：中国科技大学出版社， １９９３：７～９． 【６］４￣－－国宾，詹予忠，郭士岭．手性拆分技术进展『Ｊ］．河南化工，２００２，ｌ： １～３． ［７］周同惠．薄层色谱法叨．分析实验室，１９８６，５（９）：３５－４１． 【８］Ｍ．Ｒｅｍｅｌｌｉ，Ｒ．Ｐｉａｚｚａ，Ｆ．Ｐｕｌｉｄｏｒｉ．ＨＰＴＬＣ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ａｒｏｍａｔｉｃ ０【一ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｓ ｏｎ ａ ｎｅｗ ｈｉｓｔｉｄｉｎｅ－ｂａｓｅｄ ｓｔａｔｉｏｎａｒｙ ｐｈａｓｅ ｕｓｉｎｇ ｌｉｇａｎｄ ｅｘｃｈａｎｇｅ￣］．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉａ，１９９１，３２（５－６）：２７８￣２８４． 【９］Ｇ．Ｔｏｔｈ，Ｍ．Ｌｅｂｌ，ＶｒＪ．Ｈｒｕｂｙ．Ｃｈｉｒａ｜ｔｈｉｎ－ｌａｙｅｒ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｓｅｐａｒａ－ ｔｉｏｎ ｏｆｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅ ａｎｄ ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ［Ｊ］Ｊ．ＣｈｒｏｍａｔｏｇＬＡ，１９９０，５０４： ４５０～４５５． 收稿日期：２０１７—２—３ 作者简介：李扬（１９９１一），男，汉族，安徽临泉人，助理工程师， 硕士．主要从事环境监测工作。 ３５
