一、PBS缓冲液
1.1 母液的配制:
0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水 0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水 1.2不同PH值PBS配制
各种PH值的 0.2M PBS(100ml)配方 :
pH 0.2M NaH2PO4(ml) 0.2M Na2HPO4(ml) 5.7 93.5 6.5
5.8 92 8 5.9 90 10 6.0 87.7 12.3 6.1 85 15 6.2 81.5 18.5 6.3 77.5 22.5 6.4 73.5 26.5 6.5 68.5 31.5 6.6 62.5 37.5 6.7 56.5 43.5 6.8 51 49 6.9 45 55 7.0 38 62 7.1 33 67 7.2 28 72 7.3 23 77 7.4 19ml 81ml 7.5 16 84 7.6 13 87 7.7 10.5 0.5 7.8 8.5 91.5 7.9 7 93 8.0 5.3 94.7
以配制100ml 0.2M PBS为例,先配制母液,按照配方表分别取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4和81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4,混合即可。 1.3 不同浓度PBS的配制
只需将0.2M PBS按相应比例适当稀释 即可,如:
0.1M PBS(PH=7.4) :取 500ml 0.2M PBS,加水稀释至 1000ml 即可。 0.01M PBS(PH=7.4):取50ml 0.2M PBS,加水稀释至 1000ml 即可。
0.02M PBS(PH=7.4):取100ml 0.2 M PBS,加水稀释至 1000ml 即可。 若需要 NaCl的话,加入 NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。
二、Tris-HCl缓冲液
某一特定pH值的0.05mol/L Tris缓冲液的配制:将50ml 0.1mol/L Tris碱溶液与配方表中所示相应体积(单位:ml)的0.1mol/L HCl混合,加水将体积调至100ml 即可。(至于配制0.1M HCl 就是8.58ml浓盐酸用蒸馏水定容到1000ml啦)
各种ph值的tris缓冲液的配制 所需ph值(25℃) 7.1 7.2 7.3 7.4 7.5 7.6 7.7 7.8 7.9 8.0 8.1 8.2 8.3 8.4 8.5 8.6 8.7 8.8 0.1mol/l HCl的体积/ml 45.7 44.7 43.4 42.0 40.3 38.5 36.6 34.5 32.0 29.2 26.2 22.9 19.9 17.2 14.7 12.4 10.3 8.5 8.9 7.0